Benutzerhandbuch für Säenzellen in einen 5-Schicht-Zellkulturkolben
1. Vorbereitende Zellsuspension der erforderlichen Konzentration, dann mittelgroß in einem Behälter. Ein Volumen von 30-50 ml pro Layerisrecommended.
2.SlowlyAdd Die gemischte Lösung into den 5-layer-Zellkulturkultur mit einer serologischen Pipette. Um Schaumstoffwölzungen zu vermeiden, wird empfohlen, die Pipette fest gegen die Wand zu setzen, den Schaltstoff entlang der Steigung zu fließen und jedes Mal etwas Flüssigkeit in der Pipette zu sparen.
ANMERKUNGEN: Während die 10 -mlpipette -CandisperSthe am Boden mittelgroß ist, reicht die A25ml -Pipette nur bis zur Nestmarke, um das Medium zu zerstreuen.
3.Positionieren Sie den Mehrschichtkolben aufrecht mit dem Nest, der Sie markiert, ihn 45 ° im Uhrzeigersinn neigen und für eine Weile in dieser Position stehen lassen, um die Theliquid in jeder Schicht zu nutzen.
4. Legen Sie es mit Nest nach oben auf die Werkbank.
5. Schütteln Sie es mit dem Fromsidetosid, um die Zellen gleichmäßig auf Kulturoberflächen zu verteilen.
Anmerkungen: Seien Sie vorsichtig, um Schaumblasen vorsichtig zu toavoid und verschütten Flüssigkeit aus jeder Schicht.
6.Transferthe Flasko der Inkubator für Inkubation
Culture Mediumremoval
1.Asspiration
Kippen Sie den Flask45 ° im Uhrzeigersinn mit der Nestmarke zu Ihnen. Kontertock weise mit einem Winkel von 45 °, während Sie die Multi-Flasking in Richtung in umwenden. Damit die serologische Pipette in die Unterseite für vollständiges Aspiration bringen.
2. Pouring
Kippen Sie den Flask45 ° gegen den Uhrzeigersinn mit dem Nest, das Sie markiert, und gießen Sie die verbrauchte Medien aus dem Kolben.
Tipps: Anest 10 ml Serologische Pipetteis für vollständiges Aspiration vorgeschlagen.
CellHarvesting
1. Ringen Sie den Restserum mit Puffer aus, fügen Sie die Verdauungslösung (≥ 5 ml pro Schicht) hinzu und mischen Sie gleichmäßig. Befolgen Sie dann die Schritte 3-4, um das Reagenz auf jede Schicht zu verteilen.
2. Setzen Sie 2 min für 2 Minuten und neutralisieren und mischen Sie sie mit der inaktivierenden Lösung nach den Schritten 3-4. Wirbeln vorsichtig, um Zellen vollständig zu entfernen.
3. Übertragen Sie die Lösung in einem Zentrifugenröhrchen oder anderen Behältern durch Aspiration oder Gießen.
4. Den Kolben dreimal mit dem Puffer einsetzen und den Puffer zum Durchgang und Zählen in das Zentrifugenröhrchen geben.
Tipps: Durchsuchen Sie "Nest Multi-Layer Flask" -Video auf YouTube (@nestwuxi4075).
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